叶片氨基酸测定（叶片脯氨酸含量测定）

如何从植物中提取氨基酸？

先用蛋白酶和肽酶处理得到氨基酸，然后用有机溶剂萃取，再进行分馏。

一，植物中游离氨基酸的提取；

1，烘干材料中游离氨基酸的提取:

从植物的叶片、叶脉及种子中提取游离氨基酸一般先需要干燥处理,叶片、叶脉要在105~110摄氏度杀青,然后60~80摄氏度烘干、粉碎,过40目筛。一些研究者用75%或80%的酒精作溶剂从粉碎原料中提取氨基酸,也有用蒸馏水作萃取溶剂提取,提取的方法是常温或加热到一定温度(小于100摄氏度)用一定体积分数的萃取溶剂浸泡2~6h,或加热回流20~30min,为了使原料中的游离氨基酸尽可能得以溶解,提取过程需重复2~3次,然后合并提取液、过滤,蒸发掉乙醇,既得到了氨基酸粗提液。也有人采用蒸馏水作溶剂超声波提取提取的方法,或在室温下样品用50%乙醇浸泡微波萃取,然后离心过滤,若用氨基酸自动分析仪测定氨基酸的含量,常用2%~5%的磺基水杨酸水溶液浸提。

2，鲜叶片或鲜果肉中游离氨基酸的提取：

鲜叶片或鲜果肉中游离氨基酸的提取鲜叶片或鲜果肉一般用10%CH3COOH研磨或匀浆来进行提取,但由于鲜叶片或鲜果肉中的蛋白酶能水解蛋白质,造成游离氨基酸含量升高,故研磨要在冰浴中进行,新鲜材料中的脂、蛋白质、糖等易被提出,需加入一定的试剂除去。通常用10%三氯乙酸、一定浓度的醋酸铅、磺基水杨酸或95%乙醇加入过夜沉淀,然后离心或过滤的方法除去蛋白质,用乙酸乙酯或乙醚萃取以除去脂类等。

二，游离氨基酸的纯化；

从植物中提取的氨基酸粗提液中含有较多的色素、可溶性糖、有机酸及其他杂质,有必要对氨基酸粗提液进一步进行纯化,以便下一步进行氨基酸含量的测定。

最常用的纯化方法是用732阳离子交换树脂进行纯化。

732阳离子交换树脂在使用前要进行预处理,用一定浓度的盐酸浸泡树脂24h以上,然后用蒸馏水漂洗至中性,为的是除去树脂中的杂质,并使其完全转化成氢型阳离子交换树脂,湿法装柱,注意树脂间不能存有气泡,把氨基酸粗提液经适当浓缩到小体积后,倒入树脂柱中,让其缓慢流入树脂层,当氨基酸植物中游离氨基酸的提取、纯化及分析方法粗提液全部进入树脂后,停留10min,以便使氨基酸充分结合到树脂上,接着用一定量的蒸馏水冲洗树脂,以吸取色素、水溶性糖等杂质,当流出液变清后,用0.5~4mol/L的氨水进行洗脱,收集洗脱液至用茚三酮检测无色为止。把洗脱液用旋转蒸发仪减压浓缩至干。用0.1mol/L盐酸溶解并定容之一定体积即可。该方法氨基酸损失,纯化效果好,故最常用于植物中提取的游离氨基酸的纯化。

也有研究者用活性炭进行纯化,把具有较强吸附能力的活性炭直接加入到氨基酸粗提液中,加热一段时间,然后过滤,以除去色素等,但活性炭对部分氨基酸也能吸附,造成氨基酸的损失

哪个文献可以查植物叶子的蛋白质含量 氨基酸组成？

主要是指从植物叶片中提取FI蛋白的方法。

FI蛋白是部分I蛋白(Fraction 1 protein)简称，它具有很高的营养保健价值，Patel等(1985)和Gopalam(1985)认为高营养品质的烟叶中FI蛋白是尚待开发的食品资源。它可以作为人们消耗的高级营养食品添加剂。营养学研究表明，烟叶中FI蛋白的营养特性类似于鸡蛋白和牛奶蛋白中的精华(King等1978)，其蛋白效率比率(PFR)超过公认的蛋白标准酪朊(Casein)；Ershoff(1978)在以蛋白作为添加剂的动物喂养实验中，FI蛋白与其它多种蛋白作为对比，结果表明用FI蛋白作为添加剂的处理，在一定的时间(四周)内，动物(小白鼠)的重量增量和蛋白效率明显的高于高营养价值的酪朊及其它蛋白添加剂处理。据张素清(1992)报道，FI蛋白的结晶渗入到其它原料中制成食品，适合于肾功能失调及手术后的病人使用。高纯度的FI蛋白为白色粉末，无色、无味、无碳水化合物，不含脂类及其它污染，更没有烟叶中的其它化学成分。陈瑞泰(1982)认为高纯度无杂质的FI蛋白，完全具有制药的潜势。另外很多报道都表明了FI蛋白含有很高比例的必需氨基酸含量。我们也分析了FI蛋白中各种氨基酸的含量(如表1)，结果表明它的几种主要的必需氨基酸含量超过了国际粮农组织(FAO)规定的氨基酸含量标准。

谷氨酸能代替亮氨酸配标液吗，测定叶片中游离氨基酸的含量

不能。不是一个物质，分子量不同，对应的测定方式也不同。

你用的是什么测定方法？如果是液相的话，就连出峰位置都不一样。电位滴定的话，突跃点也不同。没办法计算。

测定茶叶中氨基酸组分含量的方法及原理

傅里叶变换近红外光谱分析技术

应用原理

近红外光谱区介于可见光区与中红外光区之间，波长范围为0.75～2.5μm，波数范围为4000～13330cm-1 。由于近红外光谱区与有机分子中含氢基团(CH、OH、NH)振动的合频与各级倍频的吸收一致，因此通过扫描样品的近红外光谱，可以得到样品中有机分子含氢基团的特征振动信息。茶叶中的大多数有机化合物如茶多酚、氨基酸、蛋白质、咖啡碱、还原糖、多糖(纤维素、半纤维素、淀粉、果胶)等都含有各种含氢基团，所以通过对茶叶的近红外光谱分析可以测定这些成分的含量。而茶叶的品质或品性与它所含有的各种化学成分直接相关，如纤维素、半纤维素的含量决定了茶叶的老嫩度，氨基酸、茶多酚、咖啡碱含量及比例决定了茶冲泡后的口感。由此看出，通过分析茶叶的近红外光谱，不仅可以得到各种化学成分的含量，还能以此为依据，进一步建立关于茶叶优劣、级别、真假识别以及品种鉴定等一系列快速分析模型，从而可以从根本上避免现在茶叶化学测定的繁琐和人工审评中因个人好恶带来的误差。

傅里叶变换近红外光谱仪所运用的傅里叶变换技术是通过机内的迈克尔逊干涉仪动镜的匀速运动把待分析光变成干涉光(干涉图)，干涉图是分析光的干涉强度随光程度变化的函数，也是干涉强度随时间变化的函数。机内的计算机采集干涉图的数据，通过傅里叶变换(多次的数值积分)，把干涉图变换成光谱图。由于干涉光提供了很高波长分辨率的全光谱，因此傅里叶变换后的信号提供了较其他类型仪器通常所能达到的更高信噪比。傅里叶变换技术是信号处理和波谱解析的有力手段，利用傅里叶变换可从数据中提取更多的有用信息，即以傅里叶级数拟合原光谱曲线，用较少项的级数就可获得与原光谱良好的近似，从而使所得谱线平滑，消除了部分噪音。因此傅里叶变换技术能使近红外光谱仪有效地应用于大量样品的高精度快速分析。