氨基酸纸层析（氨基酸纸层析法实验失败原因）

本文目录一览：

• 1、层析法分离氨基酸的原理是？详细说明，谢谢
• 2、氨基酸的分离鉴定–纸层析法 有什么注意事项
• 3、氨基酸的纸层析法中点样为什么要小于0.5cm
• 4、氨基酸的纸层析分离原理是什么？
• 5、如何用纸层析法对氨基酸进行定性和定量的测定
• 6、氨基酸的纸层析分离，将层析滤纸干燥以后，为什么再用手碰过后还会留下颜色

层析法分离氨基酸的原理是？详细说明，谢谢

二、原理

纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分

配层析法，其中滤纸纤维上吸附的水是固定相

水是固定相，

配层析法，其中滤纸纤维上吸附的水是固定相，

展层用的有机溶剂是流动相

在层析时，

有机溶剂是流动相。

展层用的有机溶剂是流动相。在层析时，

将样品点在距滤纸一端约2～

的某一处，

将样品点在距滤纸一端约

～3cm的某一处，

的某一处

该点称为原点；

该点称为原点；然后在密闭容器中层析溶剂

沿滤纸的一个方向进行展层，

沿滤纸的一个方向进行展层，这样混合氨基

酸在两相中不断分配。由于分配系数（

酸在两相中不断分配。由于分配系数（Kd）

不同，结果它们分布在滤纸的不同位置上。

不同，结果它们分布在滤纸的不同位置上。

物质被分离后在纸层析图谱上的位置，

物质被分离后在纸层析图谱上的位置，可用

比移值（

来表示。

比移值（Rf）来表示。

所谓R

是指在纸层析中，

所谓

f，是指在纸层析中，从原点至氨基酸

停留点（又称为层析点）中心的距离（

）

停留点（又称为层析点）中心的距离（X）与

原点至溶剂前沿的距离（

）的比值。

原点至溶剂前沿的距离（Y）的比值。如图

原点到层析点中心的距离

X

Rf

=

=

Y

原点到溶剂前沿的距离

在一定条件下（如温度、展层剂的组成、

在一定条件下（如温度、展层剂的组成、

层析纸质量等不变），某种物质的R

），某种物质的

层析纸质量等不变），某种物质的

f

值是常

因此可作为定性依据。

数，因此可作为定性依据。

由于氨基酸无色，

由于氨基酸无色，可利用茚三酮反应使

氨基酸层析斑点显色，从而作定性分析。

氨基酸层析斑点显色，从而作定性分析。本

实验利用纸层析法分离氨基酸。

实验利用纸层析法分离氨基酸。

氨基酸的分离鉴定–纸层析法 有什么注意事项

点样时要避免手指或唾液等污染滤纸有效面（即展层时样品可能达到的部分）。

氨基酸的一个重要光学性质是对光有吸收作用。20种Pr——AA在可见光区域均无光吸收，在远紫外区（220nm）均有光吸收。

在紫外区（近紫外区）（220nm～300nm）只有三种AA有光吸收能力，这三种氨基酸是苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸，因为它们的R基含有苯环共轭双键系统。

扩展资料：

物理性质：

氨基酸为无色晶体，熔点超过200℃，比一般有机化合物的熔点高很多。α-氨基酸有酸、甜、苦、鲜4种不同味感。谷氨酸单钠盐和甘氨酸是用量最大的鲜味调味料。氨基酸一般易溶于水、酸溶液和碱溶液中，不溶或微溶于乙醇或乙醚等有机溶剂。

氨基酸在水中的溶解度差别很大，例如酪氨酸的溶解度最小，25℃时，100g水中酪氨酸仅溶解0.045g，但在热水中酪氨酸的溶解度较大。赖氨酸和精氨酸常以盐酸盐的形式存在，因为它们极易溶于水，因潮解而难以制得结晶。

参考资料来源：百度百科-氨基酸

氨基酸的纸层析法中点样为什么要小于0.5cm

主要是为了防止层析后氨基酸斑点过度扩散和重叠，吹风温度不宜过高，否则斑点变黄。

在蛋白质氨基酸的组成分析中引入了纸层析分析的技术，使氨基酸分析获得了决定性的进展。在滤纸纤维上吸附着一层水保持成为固定相。

另一部分是能溶于水的有机溶剂，如苯酚或正丁醇作为流动相，它沿着滤纸长的方向向上或向下流动。

扩展资料：

蛋白质水解产物中的氨基酸则分配于这两相之间。氨基酸的亲脂性愈强，则与有机溶剂一起移动的倾向愈大；氨基酸的亲水性愈强，则被保留在固定相中的趋势愈大。

利用待分离物质中不同组分的某些理化性质的差异而建立起来的一种分离技术。所有的层析系统均是由固定相和流动相组成，固定相为固体物质或固定于固体物质上的成分，流动相是可以流动的物质如水和各种溶剂。

氨基酸的纸层析分离原理是什么？

纸层析法（paper chromatography）是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术，可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法，其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相，展层用的有机溶溶剂是流动相。在层析时，将样品点在距滤纸一端约2～3cm的某一处，该点称为原点；然后在密闭容器中层析溶剂沿滤纸的一个方向进行展层，这样混合氨基酸在两相中不断分配，由于分配系数（Kd）不同，结果它们分布在滤纸的不同位置上。物质被分离后在纸层析图谱上的位置可用比移值（rate of flow, Rf）来表示。所谓Rf，是指在纸层析中，从原点至氨基酸停留点（又称为层析点）中心的距离（X）与原点至溶剂前沿的距离（Y）的比值：

在一定条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、温度、湿度、层析滤纸的型号和质量等因素有关。

参考于：

希望能帮助您。^__^

如何用纸层析法对氨基酸进行定性和定量的测定

1、在滤纸条上端边缘约1厘米的中央剪一小孔。

2、将滤纸条平放于洁净的纸上，在距离滤纸下端25px处用铅笔轻画一横线，并在横线的中央画一直径为2mm的小圆圈。

3、用毛细管吸取氨基酸混合液，在滤纸条下端的小圆圈内点样。

4、取干燥大试管，加入被水饱和的酚溶液10ml，注意勿使溶液沾到试管壁上，将试管垂直固定在距滤纸条下端12.5px处穿大头针。从滤纸条上端小孔处穿棉线并左右分开，调节线的高度使滤纸垂直悬于试管内且下湍浸入溶液12.5px，注意勿使点样点浸入溶液中，亦勿使滤纸条接触试管壁。

5、此时即可看到溶剂向上移动，溶剂升到一定高度时，小心将纸条取出，以铅笔标出溶剂上升的前沿。

6、将滤纸条两端，用大头针钉在小木框上，吹干后用喷雾器均匀地喷一层0.2%茚三酮乙醇溶液，然后再将滤纸条吹干，即可看到纸上显出三色点，每个色点代表一种氨基酸。

在层析时，将样品点在距滤纸一端约2～3cm的某一处，该点称为原点；然后在密闭容器中层析溶剂沿滤纸的一个方向进行展层，这样混合氨基酸在两相中不断分配，由于分配系数不同，结果它们分布在滤纸的不同位置上。

纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法，其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相，展层用的有机溶溶剂是流动。

扩展资料：

在滤纸纤维上吸附着一层水保持成为固定相，另一部分是能溶于水的有机溶剂，如苯酚或正丁醇作为流动相，它沿着滤纸长的方向向上或向下流动。

氨基酸的亲脂性愈强，则与有机溶剂一起移动的倾向愈大; 氨基酸的亲水性愈强，则被保留在固定相中的趋势愈大。

以纸为载体的色谱法。固定相一般为纸纤维上吸附的水分，流动相为不与水相溶的有机溶剂；也可使纸吸留其他物质作为固定相，如缓冲液，甲酰胺等。将试样点在纸条的一端，然后在密闭的槽中用适宜溶剂进行展开。

当组分移动一定距离后，各组分移动距离不同，最后形成互相分离的斑点。将纸取出，待溶剂挥发后，用显色剂或其他适宜方法确定斑点位置。根据组分移动距离（Rf值）与已知样比较，进行定性。

用斑点扫描仪或将组分点取下，以溶剂溶出组分，用适宜方法定量（如光度法、比色法等）。

参考资料来源：百度百科-氨基酸纸层析法

百度百科-纸层析法

氨基酸的纸层析分离，将层析滤纸干燥以后，为什么再用手碰过后还会留下颜色

氨基酸的结构如下：

RCH(NH2)COOH.

含有氨基NH2和羧基COOH的化合物，因此很难挥发。

干燥滤纸仅仅是溶剂挥发了，而氨基酸仍然保留在滤纸上，因此，当触摸后会有颜色留下（因为你手上会有人体排出的蛋白，脂肪，和肽一类的物质，而发生颜色反应。）