今天又搞一天的实验,累死我。不过总算是把肥料里氨基酸的测定搞定,也算没白忙活。跟大伙儿唠唠我这一天的经过,也算是个记录。
早上起来,我就琢磨着今天得把这事儿给弄利索。为啥?因为之前试过好几种办法,像什么茚三酮比色、甲醛滴定,还有色谱法,都不太好使。要么就是结果不太准,要么就是步骤太多,麻烦得很,还费时间。今天我打算试试那个叫分光光度法的,据说这方法又快又准,特别适合测液体或者那个团体水溶肥料里的游离氨基酸含量。
开干之前,我先把要用的东西都准备我得把试样里的蛋白质给去掉,省得它捣乱。我就用磺基水杨酸,这玩意儿能把蛋白质沉淀下来。然后,我还得用那个EDTA,把金属元素给络合,这样氨基酸才能被释放出来。这还不算完,我还得把各种氨基酸给分开,再让它们跟茚三酮发生反应,显出色来。我记得以前好像在哪儿看到过,这个方法是根据一个叫NY/T 1975-2010的农业标准来的,这个标准里头推荐两种方法,一个是什么氨基酸自动分析仪法,还有一个是柱前衍生-液相色谱仪法。我今天用的这个分光光度法,好像是一个叫广西肥料协会的单位搞出来的团体标准,叫啥《含氨基酸水溶肥料游离氨基酸含量的测定—分光光度法》。他们还定个项目周期,6个月,说明年,也就是2022年12月就能完成。
准备工作做好,我就开始动手。我按照那个标准里的步骤,一步一步来。先把试样处理然后放到那个叫分光光度计的仪器里头。这仪器可神,能测出不同物质对光的吸收程度,然后我就能算出氨基酸的含量。过程也不算太复杂,但还是挺费时间的。主要是中间有几个步骤,得特别小心,要不然结果就不准。比如说,那个显色反应,温度和时间都得控制还有就是,那个标准溶液的浓度,也得配得准准的,要不然测出来的结果就会偏大或者偏小。
我弄一上午,总算是把几个样品都测完。看着那些数据,心里还挺美的,至少结果看着还算正常。下午,我又把这些数据整理一下,做个表格,这样看起来更清楚。我还把今天的实验过程和结果都详细地记录下来,省得以后忘。
- 实验中,我发现:
- 1、用磺基水杨酸沉淀蛋白质这一步挺关键的,沉淀不完全的话,会影响后面的测定结果。
- 2、那个EDTA溶液的浓度也挺重要的,太浓不行,太稀也不行。
- 3、用分光光度计测量的时候,得先把仪器校准要不然测出来的结果也不准。
今天这一天虽然累,但还是挺有收获的。至少,我把这个肥料里氨基酸的测定方法给搞明白,以后再遇到类似的问题,我就知道该怎么做。也希望我今天唠叨的这些,能对大伙儿有所帮助。
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