用磷酸缓冲液洗脱氨基酸(三聚磷酸钠)

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利用透析法纯化蛋白酶时,应以磷酸缓冲液作为透析液。 为什么要用磷酸缓冲液?

1,容易配制,经济方便;

2,受温度影响小,缓冲能力强;

3,对大部分蛋白和酶的结构及活性没影响,便于后续实验。

需要指出的是,不是所有的酶都适用于磷酸缓冲液,如某些以磷酸根为底物的酶。

用磷酸缓冲液洗脱氨基酸(三聚磷酸钠)

在PH3左右,氨基酸混合液(酸性,碱性,中性三类),经阳离子交换树脂被洗脱分离,这三类氨基酸的洗脱顺序

顺序:碱性氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸

由于是交换树脂层析,氨基酸的与树脂的亲和力主要取决于他们之间的亲和力,其次是氨基酸与树脂之间的疏水相互作用。由于缓冲液先是碱性,所以氨基酸与树脂的亲和力为:酸性氨基酸》中性氨基酸碱性氨基酸(阴离子树脂的疏水基团带正电,负电被交换了)。

扩展资料:

氨基酸结晶的熔点较高,一般在200~300℃,许多氨基酸在达到或接近熔点时会分解成胺和CO2。

绝大部分氨基酸都能溶于水。不同氨基酸在水中的溶解度有差别,如赖氨酸、精氨酸、脯氨酸的溶解度较大,酪氨酸、半胱氨酸、组氨酸的溶解度很小。各种氨基酸都能溶于强碱和强酸中。但氨基酸不溶或微溶于乙醇。

参考资料来源:百度百科-酸性氨基酸

请求帮忙,有关氨基酸洗脱

1 PH=2~3比较好

2 Ph逐渐升高,盐离子强度逐渐增强

3 顺序从先到后:asp gly leu lys

以下是跟你这个题同类的,具体原因写在下面

Lys Arg Asp Glu Tyr Ala的混合物在高pH条件下加到阴离子交换树脂上,用连续递减pH值缓冲溶液洗脱

悬赏分:50 – 解决时间:2010-11-4 17:42

预测这些氨基酸的洗脱顺序 请详细说明下这个洗脱顺序的理由和阴离子交换树脂洗脱的一般规律 谢谢

提问者: sd3318405 – 四级最佳答案洗脱先后顺序:Arg Lys Tyr Ala Glu Asp

先分组:1 Arg Lys是碱性氨基酸 PH=7 正电荷

2 Tyr ALa是中性氨基酸 PH=7 中性为主

3 Glu Asp是酸性氨基酸 PH=7 酸性

由于是交换树脂层析,氨基酸的与树脂的亲和力主要取决于他们之间的亲和力,其次是氨基酸与树脂之间的疏水相互作用。由于缓冲液先是碱性,所以氨基酸与树脂的亲和力为:酸性氨基酸》中性氨基酸碱性氨基酸(阴离子树脂的疏水基团带正电,负电被交换了),洗脱的顺序就是:碱性 中性 酸性

考虑氨基酸与树脂的疏水作用:Arg的R基团是三个亚甲基+一个亚氨基,Lys是四个亚甲基,很明显,Arg的疏水作用要弱,与树脂吸引力不够强,最先被洗下来。其他的两组楼主自己分析R基团的疏水性

磷酸缓冲液的优点与缺点

磷酸缓冲液的优点:(1)易配制各种浓度的缓冲液;(2)适用的pH值范围宽,可配置各种pH值的缓冲液;(3)pH受温度影响较小;(4)缓冲能力强,缓冲液被稀释后pH变化小。

磷酸缓冲液的缺点:(1)易与常见的钙离子Ca2+、Mg2+及一些重金属离子缔合形成沉淀;(2)会抑制某些生化反应过程,如抑制某些酶的催化过程等。

盐析纯化血浆中的免疫球蛋白为什么要用磷酸缓冲液

缓冲液的作用是稳定特定的pH范围,故我的理解是,当盐析血浆重的蛋白质时,由于蛋白成分复杂,很容易在广域的pH范围下析出多种蛋白,当保持特定的pH值或者保持在一个相对比较狭窄的阈值内,能使某些特定的蛋白析出,而不需要的不析出,达到纯化的目的

茚三酮法测定氨基酸时磷酸缓冲液的作用是什么?

你好!

调整PH值,防止氨基酸被OH-反应了,导致测定不出

希望对你有所帮助,望采纳。

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