葡萄贮藏期病害的研究

　　葡萄是陕西省果业发展的支柱产业之一。

　　近年来随着葡萄种植面积的不断增加和一些晚熟耐贮品种引进，产量也逐年增加。以前葡萄大多以直接食用为主，直接进入流通领域。但是随产量不断增加，葡萄的产销矛盾越来越突出，因此如何延长葡萄保鲜，已成为一项十分紧迫的课题。而病害是影响葡萄贮藏保鲜的主要问题之一。目前，国内外有关这方面研究尚少，为了给防治葡萄贮藏期病害提供依据，作者于2001～2002年对低温贮藏葡萄病害发生作了较详细的调查和研究，现将结果报道如下：

　　1、试验材料与方法

　　1.1 供试品种 供试品种为晚熟优质红、黑地球葡萄，产于陕西省泾阳县农业产业示范园。

　　1.2 葡萄致病菌的分离鉴定 取不同症状葡萄病果，在病健交界处切宁小块，经消毒处理，分别接种于PDA培养基上，在25℃恒温箱内培养，两天后挑取单菌丝进行纯化。将分离纯化后的菌种接于平板培养基上，待产生菌丝和孢子后进行镜检。

　　1.3 葡萄贮藏期病害调查 供试材料红、黑地球葡萄，每袋5kg，贮藏温度为0℃，包装袋内放葡萄保鲜剂和吸水纸。于贮藏前、贮后30天、70天、120天，分别调查病害发生种类和危害程度。调查时每品种随机选100粒，统计发病果数，重复3次，计算各种病害的发病率。

　　1.4 病原菌生长与外界因素的关系

　　1.4.1 病原菌生长与温度的关系 将从发病葡萄上分离纯化得到的不同病原菌，接种到PDA培养基上，分别放置于0℃、3℃、8℃、15℃、20℃、25℃、30℃、不同温度下培养，观察菌落的生长速度，每天测量记录菌落直径。

　　1.4.2 病原菌生长与PH值的关系 用乳酸和碳酸钠调试培养基PH值，用精密PH试纸测试，分别将p发生H值调为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0，经灭菌后接种，放置于25℃恒温箱培养观察，每天测量记录菌落生长直径。

　　2、结果与分析

　　2.1 分离结果 葡萄贮藏期病害经分离鉴定，主要有灰霉病、根霉病、青霉病等。

　　（1）灰霉病 该病的病原为真子囊菌亚纲，柔膜菌目，核盘菌科，灰葡萄孢属，（Botrytisd-nerea Pers.ex.Fr）有性世代为富氏葡萄盘菌，［Botryotinia fuekeliand（debary）Whetzel］分生孢子为卵圆形或椭圆形。菌核黑色，形状不规则，菌核比黄瓜灰霉菌核稍小。灰霉病在葡萄上发病有三次，第一次为落花后幼果期，第二次果实成熟期，第三次为葡萄储藏期。贮藏期葡萄果实上发病，早期表现症状为果皮上出现直径2～3圆形凹陷病斑，病斑颜色稍浅于周围正常组织，用手轻压病斑则病斑处表皮破裂使果肉暴露，发病后期病果软腐，病果上产生灰色霉层（即病原菌菌丝），菌丝上产生大量的分生孢子梗和孢子，甚至在果实上产生少量的菌核，最后果实完全丧失商品价值。

　　（2）根霉病该病的病原为藻菌纲，毛霉目，毛霉科，根霉属［Rhizopus nigricans Ehrenb］在PDA培养基产生白色的气生菌丝，菌丝呈弓状弯曲，且很快在菌丝顶端产生黑色的实体。在于基质接触处产生假根，假根发达，分支多，褐色，孢囊梗直立不分枝。根霉在葡萄储藏期主要为害穗轴、果梗和果实，病原菌多从伤口入侵。发病初期病斑呈渍水状被害部位变软，但是很快长出白色长毛，受害果实易从果梗上脱落。如果将葡萄从冷库中取出，在受害部位产生粗菌丝体并形成许多褐色子实体，葡萄很快腐烂。

　　（3）青霉病该病病原为丛梗孢目，丛梗孢科，青霉属，指状青霉组［P.digitatum.sace］在PDA培养寄上，菌落绒状；初为白色，后变为橄绿色，背面暗褐色，分生孢子梗较短，帚状分枝，大而不规则，分生孢子卵圆形至圆柱形。孢子呈粉末状，因此个别果实一旦发病，将很快感染其它果实。

　　果实感染青霉病菌后，在果实上形成褪色圆形或半圆形凹陷斑，逐渐变成暗黄绿色，最后变成橄绿色，果皮皱缩，果实软化，果肉变成透明浆状物。腐烂组织有一股发霉味道。

　　2.2 贮藏期病害危害情况 对冷库贮藏的红、黑地球葡萄在入库前调查，无明显发病症状，发病率为0；贮藏30天调查灰霉病发病率为7.32%、根霉病发病率为2.57%、青霉病发率为0.03%；贮藏期70天后调查，灰霉病发病率为16.51%、根霉病发病率为11.62%、青霉病发病率为0.56%；贮后120天，灰霉病发病率为31.48%，根霉病发病率为17.82%、青霉病发病率为1.02%。

　　2.3 病菌生长与温度的关系 灰葡萄孢的菌丝在3℃～30℃范围能正常生长，最适的生长温度为15℃～25℃，0℃时在人工接种培养基，接种16天后菌落直径仅为0.12cm，菌丝生长缓慢，图为3℃～30℃时，4天灰葡萄孢菌丝的生长量。

　　根霉属菌丝在5℃～30℃范围内能正常生长，最适的生长温度为15℃～30℃，0℃～3℃菌丝生长缓慢，0℃时人工接种培养基上28天后仅有少量菌丝生长，3℃时接种后6天菌落直径仅为0.1cm，图为3℃～30℃时2天根霉菌丝生长量。

　　青霉病在3℃～30℃均能生长，最适的生长温度温15℃～25℃，0℃～3℃范围青霉病菌丝生长得非常缓慢，0℃时人工接种培养基上32天后仅有少量菌丝生长，3℃时接种后第8天菌落直径仅为0.11cm，图为3℃～30℃时4天青霉病菌落生长量。

　　2.4 病菌生长与pH值的关系 试验结果表明，葡萄贮藏期灰霉病菌在pH5～10均能生长，最适的PH为5～7，pH9～10菌丝生长速度随PH增大生长速度减慢，碱性对灰霉病菌有抑制作用。根霉病菌在pH5～10范围均能生长，碱性对根霉生长影响不显著。

　　3、小结与讨论 葡萄贮藏期病害发生严重，症状复杂，是由几种真菌复合侵染所致。其中危害最严重的是灰霉病，其次是根霉病，青霉病危害最轻。随着葡萄贮藏期的延长，病害的发生呈不断上升趋势。病害的严重发生制约着储藏业的发展。

　　红、黑提葡萄为晚熟品种，一般采收较晚果实上潜伏了大量的病菌，浆果含糖量高。虽然葡萄储藏期温度较低，但是储藏期浆果pH值处于酸性条件下，葡萄储藏期微环境空气湿度较大，为各种病害发生蔓延创造了有利的条件。