肥料氨基酸液(氨基酸渗液怎么处理)

氨基酸液如何保存

组织化学是指以常用的组织化学技术,对细胞内主要化学成分和活性的粗略(一般性)的研究.

概要介绍如下:

一,______核酸(DNA和RNA)

(一)__化学特性

1.分布: DNA(细胞核内)

RNA(核仁10%;细胞质-核糖体90%)

2.分子结构:戊糖+磷酸+碱基

特点:①大量的磷酸基团→酸性

(嗜碱性的基础)

②戊糖—被盐酸水解→醛基

(成为Feulgen法显示核酸的基础)

②戊糖—被盐酸水解→醛基(成为Feulgen法显示核酸的基础)

③可以完全水解或部分水解

④可以用RNAase或DNAase消化

[对照实验(—)]

_

(一)__显示方法

1.福尔根(Feulgen)反应显示DNA

[原理 ]在60℃温度下,将DNA用1N盐酸水解,DNA双链打开成单链,先释出碱基,然后脱氧核糖释出醛基,该醛基与Schiff氏液形成紫红色沉淀.

[ Schiff试剂显色原理 ]

碱性品红亚硫酸→白亚黄酸

(无色试剂,称为Schiff试剂)

[方法]

固定剂的选择可用一般的组织学固定液,常

用Carnoy固定液.

Carnoy固定液:

纯酒:氯仿:冰醋酸= 6:3:1

(60ml)(30ml)(10ml)

恒冷箱切片机的具体染色步骤如下:

⑴切片固定在冰醋酸与纯乙醇(1:3 V/V)

中10分钟.

⑵由乙醇降至蒸馏水中.

⑶用1N盐酸浸泡.

⑷放入预热到60℃的1N盐酸中,留6分钟.

⑸放入室温的1N盐酸中.

⑹放入Schiff液试剂,保持在暗处,60分钟

⑺用新配制的SO2水浸洗3次(脱掉未反应

的Schiff液).

⑻蒸馏水浸洗净(必须用蒸馏水→洗净无色品红,

否则,残留试剂→有色品红).

⑼脱水透明,封固.

结果:核内DNA染为红紫色.

对照:仅改变第4步为1N盐酸,室温15分钟→(-).

[注意事项 ]

⑴不用醛类固定剂如Bouin,戊二醛,丙烯醛等.

常用Carnoy液,甲醇等.

⑵控制水解时间,不同的固定剂用不同的时间,

如:Carnoy 8分钟;Genker 5分钟;

Susa 18分钟★最适条件应自行试验.

⑶控制温度,一般1N盐酸60℃;

如果5N盐酸18～25度.

⑷保证Schiff试剂的纯净度.

⑸ SO2要新配制,除去多余的 Schiff液宜用之.

⑹必须对照.

2._显示核酸的其它方法

⑴ Kurnick甲绿Methylgreen显示DNA法

⑵甲绿派若宁Methy green-Pyronin显示DNA和

RNA法

⑶菊花青铬明矾(GC)显示核酸法

⑷丫啶橙Acridine Orange显示DNA和RNA法

⑸核酸提取法

_一,______蛋白质(Protein)

_

(一)蛋白质的分子结构

蛋白质的基本单位是氨基酸,肽键将不同的氨基酸结合在一起,除氨基和羧基之外,还含有其它基团,如:—羟基,硫氢基,二硫基等.依其结构特点可分为:酸性氨基酸和碱性氨基酸;芳香族氨基酸:苯丙氨基酸,酪氨基酸;杂环类氨基酸:组氨基酸,色氨基酸,亚氨基酸,脯氨基酸,羟脯氨基酸.

_

(二)目前应用

1._用于蛋白质的一般定性

①确定是否为蛋白质

②确定蛋白质的酸碱性

③显示蛋白质的特殊基团

2._用于蛋白质功能定性和定位

_(三)染色方法

目前,研究蛋白质功能定性和定位时多用酶

组织化学法,配体—受体结合法,免疫组化法以

显示特殊的蛋白质.这里仅介绍一般的染色方法.

1.四氮化联邻茴香胺法

(Tetra-azotized-o-anisidine)

[应用 ]广泛应用于显示酶的活性

[原理 ]芳香伯胺与亚硝酸作用,在低温下(<

5℃)可生成重氮盐,此即重氮反应.重氮盐可

与酚类作用生成有色化合物——偶氮化合物.上

述反应必须在酸性条件下进行.

本实验,联邻茴香胺在酸性,低温条件

下与亚硝酸作用生成四氮盐.四氮盐有两个

重氮盐,其中一个重氮基在碱性条件下与所

要显示的组氨酸,色氨酸及酪氨酸的苯环结

合产生偶联反应,另一个重氮基与酚类或奈

类发生偶联反应以增色.因此,可以用生成

的偶氮染料来代表组织细胞的蛋白质含量.

[方法 ]

1._四氮盐配制

⑴天平称取联邻茴香胺0.25g(有毒,通

风橱内进行).

⑵在冰浴下,加入已预冷8%盐酸10ml,

玻璃搅拌,促其溶解,混合后为悬浊液.

⑶称NaNO2 0.15g溶于1ml蒸馏水中(冰浴

下).

⑷在冰浴下,将配好的NaNO2溶液分三次倒入邻联茴香胺悬浊液内,每次倒入都须玻棒搅动,因产生NO2可有黄烟冒出,至黄烟停止再倒下一次液体.放入冰箱(4℃)内,约20分钟,待溶液变为黄色.

⑸倾出上清液,勿将沉渣泛起,弃去沉渣.

⑹用NaHCO3细粉(约0.5～0.6g)逐渐加

入上清液内,边加边搅拌(冰浴下).

⑺以刚果红试纸测中和点,待试纸不变蓝即达到中和.收集于标本瓶(或广口瓶)内,置冰箱备用.此液不稳定,置冰箱内可保存两周,若变为橘红色则失效.

_

2._偶氮反应

—Carnoy固定的大鼠肝,肠等石蜡切片.

⑴切片脱蜡至水.

⑵将切片放入下列溶液中(在冰浴中至2～3℃),

浸染10分钟.

用前配制:

四氮化联邻茴香胺溶液 4ml

0.1巴比妥缓冲液(pH9.2) 20ml

24ml

⑶入1N盐酸(冰浴中2～3℃)浸洗10秒,多余盐

酸以滤纸吸干.

⑷入H酸饱和液,浸染30分钟(冰浴或冰

箱内).

H酸饱和液配制:H酸 0.4g

0.1M巴比妥缓冲液 20ml

(pH9.2)过滤后使用!

⑸蒸馏水冲洗,脱水,透明,封固(树胶)

[结果 ]

酪氨酸,组氨酸,色氨酸染成红棕色(+)

※ 0.1M巴比妥钠50ml配制

①分析天平称巴比妥钠(MW=206.18)

1.0309g

②于量瓶内+蒸馏水50ml至刻度即可.

0.1M巴比妥缓冲液,pH9.2(20ml)配

制: 0.1M巴比妥钠 19.1ml

0.1N盐酸 0.9 ml

20 ml

2.其它的显示蛋白质的方法

⑴米朗反应(Millon Reastion)→显示酪氨

酸的方法

酪氨酸→羟苯基亚硝酸→亚硝基苯+Hg→有色物

注:胶原蛋白不显色,其它蛋白质都显色(+)

⑵二硝基氟苯Dinitro—fluoro—benzene(DNFB)法

DNFB与—NH2,SH和酪氨酸产生弱有色反应,

可被偶氮染料加强.

⑶酪氨酸重氮化偶联反应

⑷蛋白质硫氢基DDD法(固定时避免

氧化剂)

⑸铁—铁氰化钾反应显示SH基

⑹高甲酸阿尔辛蓝显示SS基法

⑺免疫荧光法显示蛋白质

三,碳水化合物

中性多糖——糖原

碳水化合物酸性多糖——硫酸软骨素 A,B,

C,肝素,硫酸角

(组织中—多糖类)质素,透明质酸等

蛋白多糖——粘蛋白,唾酸粘蛋白

糖脂——脑苷脂类

※组织中糖的种类较多,因此,要特异性地显示各种

糖类必须用抑制和酶水解来对照实验.

本章仅以高碘酸雪夫法(PAS法)说明之,其它的

方法还有Alcian blue法,甲苯胺蓝异染性染色法等.

高碘酸雪夫法 Periodic—Schiff(PAS)method

[原理 ]高碘酸为强氧化剂,它可以氧化多糖

分子内1,2—乙二醇(顺式和反式)而

产生醛基,此醛基再与Schiff试剂结合即

产生红紫色.

[方法 ]改良的McManus(1946),高碘酸雪夫法

标本:

① Carnoy固定的大白鼠肝,肾,肠石蜡切片

②大白鼠肝横冷箱切片(未固定)

[步骤 ]

(1)切片脱蜡入水(横冷箱切片免)

(2)入0.5%高碘酸水溶液,室温,2～5分钟

(3)蒸馏水涮洗

(4)入Schiff试剂,洗3次,每次2分钟

(5)入SO2水中,洗3次,每次2分钟

(6)自来水洗5～10分钟

(7)蒸馏水稍洗

(8)入Mayer氏苏木精副复染核1分钟

(9)自来水5分钟,换蒸馏水

(10)脱水,透明,封固

[结果 ]

PAS(+)→红紫色或红色;核→蓝色

Carnoy固定,糖原原位定位不佳,有

移位现象.

[对照 ]

①用唾液酸淀粉于37℃消化20～30分钟.

②苯甲酰或乙酰化法作对照(抑制法)

[注意事项 ]

①必须按照规定配方配制试剂,按规定的时间反应.以避免非特异反应.例如:入高碘酸水溶液时间不宜过长,否则非特异着色.

②多糖大多都易溶于水,固定时应避免扩散或移位.

冰冻切片+苦味酸福尔马林→固定→避免扩散或移位.

③注意溶液的pH值:高碘酸液的pH不应超过5.

④注意温度.反应宜在<25℃的室温下进行,否则可氧化醛基为羧酸.

⑤高碘酸溶液的浓度宜控制在0.5%～1%(0.02—0.1M)浓度过高则会发生非特

异反应.

⑥为充分显示多糖中的糖原,可在过碘酸

中加入5%醋酸或纯乙醇固定,但往往有

溶解和扩散.

⑦为阻止胶原纤维和网状纤维阳性反应,

可使用还原液,于使用Schiff液之前.

[分析结果 ] PAS反应阳性物质:糖原,中

性粘蛋白,中性唾液性粘蛋白.

四,脂类

[组织中的脂类 ]

单纯脂类脂肪酸

醇的化合物(如:甘油三脂等)

复合脂类磷脂(卵磷脂,脑磷脂)

脂类鞘磷脂

糖脂(脑苷脂,神经苷脂)

衍生脂类胆固醇

肾上腺素

性激素

[显示脂类的基本原理 ]

用易溶于脂类的染料,使之溶于所检

的脂质(如脂滴)中,使组织内的脂类着色.

[常用方法 ]

苏丹黑B法,油红O法,硫酸尼罗蓝法

[基本要求 ]

⑴不用石蜡切片.

⑵固定剂一般用Formalin保存磷脂较好.

⑶方法:

①物理法:脂溶性染料,不溶于水,属偶

氮染料.常用苏丹Ⅲ,Ⅳ,苏

丹黑,油红O等.

②化学方法:硫酸尼罗蓝显示脂肪酸.

③选择性提取法(对照)

实验举例:苏丹黑B法

[原理 ]

苏丹黑为偶氮染料,具有脂溶性,可

溶于无水酒精,但不溶于水(常用70%酒

精饱和液).当组织切片入染液时,苏丹

黑B便离开染液而溶于组织内的脂质(如脂

滴中)使组织内脂类着色.

标本:

兔肾上腺和睾丸横冷箱切片,10μm厚,不

固定(或用10%Formalin固定10分钟后水洗).

[方法 ]

①入蒸馏水洗

②于70%乙醇内涮洗

③入苏丹黑B 70%B饱和液,染5～10分钟

④于50%酒精内浸洗

⑤蒸馏水中洗

⑥入Mayer苏木精(复染细胞核)1分钟

⑦自来水冲洗5～10分钟

⑧入蒸馏水

⑨甘油明胶(或Apathy糖胶)封固

[结果 ]细胞内脂滴均呈黑色

氨基酸渗液怎么处理

适当热敷，或用土豆片外敷，或95％酒精涂抹促进吸收，一般3-5天就基本上好了，然后观察皮肤是否出现感染等异常，若皮肤有过敏等异常，有就诊的必要

氨基酸是什么肥料

氨基酸肥是指含有氨基酸类物质的肥料。

氨基酸是蛋白代谢的产物，也是合成蛋白质的必须物质，植物可以直接吸收氨基酸，就像能直接吸收葡萄糖一样，因为它们都是最简单的小分子。

资料：氨基酸作为构成蛋白质的最小分子存在于肥料中，有易于被作物吸收的特点；亦有提高施肥对象抗病性，改善施肥作物品质的功能。

补充植物必需的氨基酸，刺激和调节植物快速生长，促使植物生长健壮，促进对营养物质的吸收。增强植物的代谢功能，提高光合作用，促进植物根系发达，加快植物生长繁殖。

氨基酸肥料的缺点

氨基酸水溶肥如果使用不当，可能会对环境和人体造成一定的危害，具体如下：

1.污染土壤和水源。如果使用浓度过高的氨基酸水溶肥，会导致肥料过剩，土壤中的养分浓度升高，从而可能导致植物根系无法吸收养分，进而污染土壤和水源。

2.影响生态环境。氨基酸水溶肥中含有过量的氮、磷等养分，一旦释放到环境中，可能会促进水中藻类和微生物的繁殖，导致水域富营养化，从而影响水生态环境。

3.对人体健康带来潜在风险。如果使用含有毒性物质的氨基酸水溶肥，可能会对人体造成健康威胁，如引起呼吸道、皮肤和眼睛等不适症状，甚至导致中毒等问题。

因此，在使用氨基酸水溶肥时，应该按照使用说明和农药标签上的要求，正确使用和储存，避免造成环境和人体的潜在风险。

氨基酸水溶肥料的用法

水溶肥要随水一块用因为用惯了复合肥。

水溶性肥料是一种效性肥料，可以完全溶解于水中，能被作物的根系和叶片直接吸收利用。

可以进行水肥同施、以水带肥，明显提高肥料的有效利用率，可以解决高产作物快速生长期的营养需求。

氨基酸肥料是什么原料

氨基酸叶面肥能改善施肥作物品质的功能，补充植物必需的氨基酸，刺激和调节植物快速生长，促使植物生长健壮，促进对营养物质的吸收，另外的一些的比较完善的适合其它部分作物的可百度下德化叶面肥配方有较为丰富的配方及制作步骤：

第一步，原料准备，大豆粉（含水量为12%）、红糖、米醋等。

第二步，原料配制混合，按1：100比例，即100公斤大豆粉，拌1公斤金宝贝氨基酸叶面肥发酵剂，一定要搅拌均匀，此过程可称为菌剂接种。

第三步，往接种完菌剂的大豆粉中加入糖醋水，将大豆粉物料的含水量调到55-60%。

第四步，静置发酵，调好含水量的大豆粉物料，自然放置12小时，这一过程可称为“座菌”将自然放置的待发酵物料及时移到水泥池或大缸堆积发酵。为确保通气，堆积厚度一般不超过60厘米为好，堆积完毕后，上面盖上纱布或塑料布，并注意做到保温、保湿、保洁。

第五步，温度控制与调整，7～10天的发酵温度应保持在20-25℃以上，累计发酵温度达300-400℃时，可翻倒一次，翻动后立即盖上覆盖物，促使其继续发酵，等到累计发酵温度达到600℃以上（20-25天），发酵料成块，臭味基本消失，可停止发酵，

第六步，原液提取，将发酵好的肥料用浓度为5%的红糖水浸泡，然后将可提取氨基酸溶液即可。