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游离氨基酸的测定
操作步骤
1.标准曲线的制作取20ml刻度试管18支,按下表1加入各试剂。加完试剂后混匀,在100℃水浴中加热12min(加热时封口),取出在冷水中迅速冷却,立即于每管中加入5ml95%乙醇,塞好塞子,猛摇试管,使加热时形成的红色产物被空气中的氧所氧化而褪色,此时溶液呈蓝紫色。于570nm波长下测其光密度(以空白管为参比),以氨基酸浓度为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线,求出直线方程。
2.样品提取选取有代表性的植物叶片(或其它组织),洗净擦干,剪碎混匀,迅速称取0.10~0.20g(视氨基酸含量多少而定),共称3份,分别加入20ml刻度试管中,再加蒸馏水10ml盖塞(或系上塑料薄膜),置沸水浴中20min以提取游离氨基酸,到时取出在自来水中冷却,把上清液滤入25ml容量瓶中,之后再往试管中加5ml蒸馏水,置沸水浴上再加热10min,过滤并反复冲洗残渣,最后定容至刻度,摇匀。
3.样品测定另取4支洁净干燥的试管,其中3支分别加入0.5ml提取液,另一支加0.5ml蒸馏水,然后在上述4支试管中分别加入NaCN缓冲液、水合茚三酮各0.5ml,加完试剂后盖塞,置沸水浴上加热12min,冷却后,再分别加5ml95%乙醇,摇匀,以空白作参比,在波长570nm下测其光密度。
根据光密度查标准曲线(或用回归方程计算)即可求出提取液中氨基酸的浓度。
如何检测土壤中游离氨基酸的含量?
1.水分:燃烧失重法,利用酒精燃烧产生的高温,蒸发土壤中的水份,通过失水量计算土壤中的水分。
2.有机质:通过硫酸—重铬酸钾与水稀释热氧化土壤中的有机质后生成的三价铬离子的量的颜色进行比色测试。
3.有效氮、磷钾养分
应用联合浸提剂提取土壤中的有效氮、磷、钾后,氮应用靛酚蓝比色法、磷用钼锑抗比色、钾用四苯硼钾比浊法进行测定。中性、石灰性土联合浸提剂(北方)的各试剂作用如下:
H20:主要浸提氨态氮;Na2SO4:主要浸提硝态氮
NaOAc:主要浸提速效钾;NaHCO3:主要浸提速效磷
酸性土联合浸提剂(南方)的各试剂作用如下:
H20:主要浸提氨态氮:NaF:主要浸提速效磷;
Na2S04:主要浸提硝态氮;EDTA:主要浸提钾及微量元素Na0Ac:主要浸提速效钾
游离氨基酸怎么测定?
其实这个是相对的!游离氨基酸的测定主要是在样品处理的实际防止将蛋白质水解成游离氨基酸,起后面的测定就看你要的结果,如果是要总含量就用一般的紫外就可以搞定,如果你想知道样品中游离氨基酸的种类那最简单的还是用高效液相色谱法啊!不知道说的你满不满意,请纠正
小萧
ny1429-2010和ny/t1975-2010,两种方法检测出的游离氨基酸含量为何相差巨大
原因:
(NY1429-2010)是含氨基酸水溶肥料,即总氨基酸的含量
NY/T 1975-2010 水溶肥料 游离氨基酸含量的测定
食品中还有哪些方法测定游离氨基酸含量思考题
茚三酮显色法。
游离氨基酸总量测定常用方法为茚三酮显色法,氨基酸为水溶性物质,在pH为8.0的缓冲溶液中与茚三酮同时加热,可形成紫色络合物,在吸收波长570纳米处可检出光密度值,从而计算出游离氨基酸总量。
天然产的氨基酸的结构上都具有共同特点在羧基邻位α—碳原子上有一个氨基,因此称α—氨基酸。天然蛋白质由不同的α—氨基酸,通过肽键结合而成的复杂高分子化合物,结构和组成十分复杂。
扩展资料:
NY/T1975与GB/T23349有啥区别
NY/T1975是肥料中游离氨基酸含量的测定标准,是农业行业标准;GB/T23349是肥料中砷、镉、铅、铬、汞生态指标测定标准,是国家标准
棉花游离氨基酸的测定方法
棉花游离氨基酸的测定方法:
1、色谱法:色谱法是一种常用的分离和测定氨基酸的方法,可以通过气相色谱法,液相色谱法等实现,该方法适用于游离氨基酸的测定,但需要较为复杂的设备和操作,适用于实验室环境。
2、比色法:比色法是一种简单易行的测定方法,可以通过分光光度计等设备进行测量,该方法主要是通过将游离氨基酸与特定试剂反应后,通过测量反应产物的吸光度来计算游离氨基酸的浓度。
3、自动分析仪法:自动分析仪法是一种高效,准确,自动化程度较高的测定方法,主要适用于大规模的样品测定,该方法通过将样品注入自动分析仪中,经过自动反应,分离,检测等步骤,最终得出游离氨基酸的浓度。
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